2．951 7，叼r3=死／％=2．434 8，叩r4=L／死=
在50℃的条件下，将浓度为0．2 m01／L的壳
聚糖HAC—NaAC缓冲溶液分别与pH2．7、3．0、
3．3、3．6、3．9和4．2的浓缩甜酒曲溶液反应，2 h
后测定各壳聚糖缓冲溶液的黏度．测不同pH值
条件下壳聚糖缓冲溶液与酶作用后通过乌氏黏度
计的时间，计算各壳聚糖样品溶液的黏度，并根据 得到数据做'7sp—C图，直线截距即为壳聚糖样 品溶液的特性黏度．pH值对特性黏度作图(图
3)，由图3可知，在pH<3．6时，随着溶液pH值 的减小溶液特性黏度增大，而pH>3．6时，随着 溶液pH值增大溶液特性黏度也逐渐增大，在pH
=3．6时，溶液特性黏度达到最小，因此以壳聚糖 为底物的浓缩甜酒曲催化反应的最适宜pH值为
3．6．
酶糖比
图4糖酶比对酶降解反应的影响 算各壳聚糖样品溶液的黏度，并根据得到的数据
做叩sp—C图，直线截距即为壳聚糖样品溶液的
特性黏度．每隔一段时间取样，测定溶液黏度，得 到图5，如图5可知随着反应时间的延续，样品溶 液的黏度逐渐下降，直到120 min后，由于产物的 抑制、酶的部分变性失活等因素的影响，酶反应速 度逐渐降低，样品溶液黏度不再下降，几乎趋于不
变，这时为最佳反应时间．
nH
图3 pH值对酶降解反应的影响
2．2．3底物浓度对酶降解反应的影响 在pH=3．6、温度为50℃的条件下，将浓度
为0．2 mol／L的壳聚糖HAC—NaAC缓冲溶液分
别与糖酶比为2．5：l、5：1、7．5：1、10：1、12．5：1和
15：1的酶溶液作用2 h，测量各壳聚糖缓冲溶液 的黏度．测壳聚糖缓冲溶液分别与不同浓度的酶 溶液作用后，通过乌氏黏度计的时间，计算各壳聚 糖样品溶液的黏度，并根据得到的数据做可sp—C 图，直线截距即为壳聚糖样品溶液的特性黏度．底 物浓度对酶降解反应速度的影响曲线如图4所 示，可以看到，当底物浓度很低时，底物浓度增加， 反应速度随之加快，溶液黏度与底物浓度成反比： 底物浓度较高时，反应速度逐渐变慢，溶液黏度下 降缓慢；当底物浓度增加到一定高浓度时，继续增 加底物浓度，反应速度几乎不再加快，溶液黏度趋图5酶解时间对酶降解反应的影响
2．3最佳条件下浓缩甜酒曲降解壳聚糖
在糖酶比为10：1、pH值3．6、反应温度50
℃、反应时间2 h的条件下，得到低聚壳聚糖产 物，表征其特性黏度，实验结果见表2和图6．
袁2壳聚糖样品溶液黏度
特性黏度[对]’ ％／8 rl／s E／8 L／s 瓦／s
1
2
于不变，酶与底物结合饱和，这时为最大反应速
度．此时用酶量与壳聚糖用量之比约为1：10．
2．2．4酶解时间对酶降解反应的影响 在pH=3．6、温度为50℃的条件下，将浓度
为O．2 moL／L的壳聚糖HAC—NaAC缓冲溶液与
酶溶液以糖酶比为10：l混合，分别作用40 min、
80 min、120 min、160 min和120 min，测量各壳聚 糖缓冲溶液的黏度．测壳聚糖缓冲溶液与酶溶液 分别作用不同时间后，通过乌氏黏度计的时间，计
稀释后溶液的浓度分别为：C：=2／3×C，，C，
=1／2×c。，c。=1／3×c，；对应于各浓度的相对黏 度[矿]为：矿。=五／％=2．95，叩r：=疋／瓦=2．02， 田r3=L／‰=1．58，叼r4=瓦／瓦=1．05．
图6中直线的截距[田]=0．079×100；根据
[叩]=删4，代入K和8值，求得黏均相对分子质
量肘“一2．492×103．
溶液黏均相对分子质量肘斗一2．492×103，水解2
h后酶解液黏度不再变化．
参考文献：
C／(g•(100mL)叫)
图6 测定特性黏度时的，7sp—C图
3 结论
脱乙酰度为90％的壳聚糖较易被非专一性 混合酶浓缩甜酒曲水解，水解反应的最适温度为
50℃、pH值为3．6，低速摇床振荡对水解有利；在 壳聚糖水解初期，溶液黏度迅速下降，80 min后水 解速率逐渐减慢，至120 min后溶液黏度下降已 很缓慢；酶解液的黏度随壳聚糖及浓缩甜酒曲浓 度的增加而增大，当糖酶比为10：l时，水解2 h时，
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