2.2 LY294002与DDP联用对A549细胞周期及凋亡率的影响 DDP、LY294002及LY294002与DDP联用干预A549细胞后，各药物组凋亡率与对照组相比差异均有统计学意义（P＜0.01）；DDP＋LY294002组与DDP组及LY294002组相比差异均有统计学意义（P＜0.05）。细胞周期分布与对照组相比都发生变化，表现为S期和G2/M期细胞减少，差异均有统计学意义（P＜0.05）。LY294002+DDP组细胞与DDP或LY294002单独作用于A549细胞相比，S期和G2/M期细胞减少（P＜0.05）。见表2。
2.3 LY294002联合DDP对裸鼠移植瘤生长的影响 裸鼠皮下接种A549细胞后，约1 w左右见皮下移植瘤出现，呈圆形或椭圆形结节。在实验过程中，各组裸鼠均未出现精神、进食、排便的明显异常及死亡。各组间裸鼠体重无明显差异（P＞0.05）。LY294002、DDP组、DDP+LY294002组瘤结节重量均低于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.01）。DDP+LY294002组瘤结节重量又低于LY294002、DDP组，差异均有统计学意义（P＜0.01）。LY294002、DDP组、DDP+LY294002组的抑瘤率分别为40.3％、43.53％和67.46％，提示LY294002与DDP均能抑制裸鼠移植瘤的生长，两者联合应用抑瘤作用强于单独应用。见表3。(实验研究PI3K/Akt抑制剂联合顺铂治疗肺癌)
表1 LY294002与DDP联用对A549细胞生长的抑制效应（略）
与对照组相比：1）P＜0.05,2）P＜0.01；与DDP单用组相比：3）P＜0.05
表2 LY294002联合DDP或紫杉醇对A549细胞周期的影响（略）
与对照组相比：1）P＜0.05，2）P＜0.01；与DDP组相比：3）P＜0.05；与LY294002组相比：4）P＜0.05
表3 LY294002联合DDP对裸鼠移植瘤生长的抑制效应（略）
与对照组相比：1）P＜0.01；与LY294002组相比：2）P＜0.01；DDP组相比：3）P＜0.01
3 讨论
(实验研究PI3K/Akt抑制剂联合顺铂治疗肺癌)
非小细胞肺癌（NSCLC）约75％的肺癌患者在发现时已属晚期〔3〕，放、化疗对各期病人均为重要的治疗方法。而单纯采用化疗或放疗效果并不令人满意。研究证实DDP等化疗药物除直接杀伤肿瘤细胞外，还可诱导肿瘤细胞进入凋亡程序，由此推论，凋亡是耐药产生的共同途径〔4〕，细胞凋亡能力可直接影响化疗药物的效应〔5〕。肿瘤细胞可通过抑制进入凋亡程序，表现出对化疗药物的耐受性，是肿瘤细胞所具有的自我保护功能之一。选择性诱导肿瘤细胞凋亡已成为肿瘤治疗的一条途径，有可能改善患者的预后〔6〕。P13K信号转导通路具有调节细胞的增殖、生存和分化等功能，PI3K可上调抗凋亡基因的表达，抑制由cmyc诱导的细胞凋亡〔7〕，以抑制细胞进入凋亡程序，促进细胞生存，因此推测P13K信号转导通路可能在多细胞耐药中发挥作用。最近肿瘤分子靶向治疗研究发现信号转导途径与肿瘤进展和放、化疗抵抗有密切的关系。PI3K/Akt抑制剂在体外可抑制多种肿瘤细胞的生长，导致肿瘤细胞凋亡〔8，9〕。近年的研究还发现PI3K/Akt抑制剂LY294002可增强某些抗肿瘤药物的疗效，减少化疗抵抗〔2，10〕。
本研究显示，DDP及LY294002对A549细胞的增殖有显著抑制作用，二者联用与单独干预相比对A549细胞增殖的抑制作用增强，说明LY294002有增加化疗药物治疗效果的趋势。DDP与LY294002均可影响细胞周期的分布，使细胞阻滞于G0/G1期，二者联用后，该作用增强。裸鼠移植瘤体内实验结果表明LY294002、DDP均能抑制裸鼠移植瘤的生长，LY294002与DDP联用时抑瘤率增加，说明LY294002能促进DDP的抑瘤效应。以上作用可能是通过以下3方面来实现的：①LY294002使细胞周期阻滞G0/G1期，抑制细胞的增殖；②LY294002促进细胞的凋亡；③有研究发现〔11〕若将P13K亚单位基因引入体外细胞系中，可使PI3K/Akt信号转导通路活性增强，细胞对化疗药物的敏感性会随之降低，耐药性增强。说明LY294002也可能通过增强对信号转导通路的调控增强肿瘤细胞对DDP的敏感性，从而使DDP的化疗效果增强。本研究过程中各组裸鼠均未出现精神、进食、排便的明显异常及死亡。实验结束后各处理组裸鼠体重亦无显著差异，解剖未见远处及局部淋巴结转移，各组肝、胃及肠道等重要脏器的HE染色未发现明显差异，说明LY294002在体内应用相对来说是安全的。但LY294002对人体是否有毒副作用及增加化疗药物的抗癌效果，由于细胞内及动物脏器的生理特点与人类有差别，还需要进一步的研究去证实。
本研究认为，LY294002可促进Akt高表达肿瘤的抗肿瘤药物的疗效，而对于Akt低表达的肿瘤化疗效果无影响，其促进化疗疗效的作用主要是通过促进细胞凋亡实现的。而Howells等〔12〕在应用LY294002作用于乳腺癌细胞时，却发现其抑制癌细胞增殖与导致细胞凋亡并无直接关系。因此，LY294002本身抗肿瘤及与化疗的协同作用具体机制还不清楚，还存在许多悬而未决的问题，仍需进一步的更加精确的研究证实。
【参考文献】
(实验研究PI3K/Akt抑制剂联合顺铂治疗肺癌) 1 Westfall SD,Skinner MK.Inhibition of phosphatidylinositol 3kinase sensitizes ovarian cancer cells to carboplatin and allows adjunct chemotherapy treatment〔J〕.Mol Cancer Ther，2005；4(11):176471.(责任编辑：南粤论文中心)转贴于南粤论文中心: http://www.nylw.net(南粤论文中心__代写代发论文_毕业论文带写_广州职称论文代发_广州论文网）
