Analysis of LGT Different Expression and Long-term Survival Using FOLFOX Chemotherapy after Colorectal Cancer Surgery/ZHANG Jing，PEI Yi.// Medical Innovation of China，2012，9(23):006-008
　　【Abstract】　Objective: To study the different expression of LGT　and Long-term survival of FOLFOX chemotherapy after colorectal cancer surgery.Method: Choose 55 patients use surgical treatment of parallel colorectal，between January 2006 to January 2009.All the patient detect SELDI to get the map of fingerprint ，use four to six cycles of FOLFOX chemotherapy，follow-up to August 2011. A different age， gender， LGT express or not， under the conditions of disease progression of survival and without a median of two groups of the differences. Result:In the absence of survival and disease progression median survival were no significant difference (7.85， 6.50，P=0.770;15.75:13.00，P=0.517)between ≥65 years old group and< 65 years old group;There is no significant difference among the men and women group (8.50，4.95， P=2.057;17.00:10.00，P=1.622).No disease progress for a median is 2.8 months in LGT positive patient， 10 months in LGT negative patient(P=0.000).Progress for a median is 5.85 months in LGT positive patient， 18.5 months in LGT negative patient(P=0.000).Conclusion:Both the no disease progress for a median and progress for a median in LGT positive group is far lower than　the LGT negative group.Before the operation such as LGT positive for express， first control LGT， LGT expression to normal after poste operation， to ensure that the treatment effect.
　　【Key words】　 Colorectal cancer;　Consolidate chemotherapy;　LGT;　Prognosis
　　First-author’s address: Shanxi Medical University，Taiyuan 030001，China
　　doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.23.003
　　结直肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤，发生率仅次于胃癌和食管癌，在我国常见恶性肿瘤死亡中，结直肠癌患者在男性占第五位，女性占第六位。近20年来，结直肠癌的发病率在逐渐增加，同时，其发病年龄趋向老龄化。结直肠癌术后5～10年生存率，化疗作为根治术的诊时有25%的患者已经存在转移病变，根治术后50%的患者会发生复发或转移，因此绝大多数结直肠癌患者需要化学治疗。多年来的临床研究表明，根治术后辅助化疗可明显改善结直肠癌的生活质量和存活。根据NCCN辅助治疗有一定价值。根据NCCN指南，结直肠癌辅助化疗首选FOLFOX方案。 影响结直肠癌患者预后的因素很多，涉及到临床、病理特点、各系统的综合作用等。确定有效的预后参数，能正确估计预后，有助于治疗方案的制定[1]。本研究分析了55例经手术治疗，术后辅以FOLFOX方案巩固化疗的结直肠癌患者，分析LGT不同表达对其巩固治疗后远期生存的影响。现报道如下。
　　1　资料与方法
　　1.1　一般资料　选取本科2006年1月-2009年1月收治的首次入院，入院时均进行危重病人预警蛋白(LGT)检测，并行手术治疗的结直肠腺癌患者55例，术后均进行标准FOLFOX方案巩固化疗(奥沙利铂85 mg/m2，d1；亚叶酸钙200 mg/m2，d1、d2；氟尿嘧啶400 mg/m2，静推，d1、d2，600 mg/m2，持续静脉泵入22 h，d1、d2；每两周重复)4～6周期。其中男35例，女20例，中位年龄62岁，入组时均经病理学诊断证实，且排除影响血清蛋白质水平的疾病。以该患者就诊时间(入组时间)为生存时间起点，在2011年8月30日前对上述患者疾病状态(进展与否)及生存状态(死亡与否)通过查阅病历、电话随访的方式获得。
　　1.2　实验方法　分组：(1)年龄以65岁分组；(2)性别以男女分组；(3)以LGT表达表达与否分组。
　　实验设备：PBS-Ⅱc表面增强飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)、能量吸收分子EMA，CM10型蛋白质芯片及相应分析软件ProteinChip 3.2.0、Biomarker Wizard (美国Ciphergen公司)，HFPFS缓冲盐(Sigma公司)，CHAPS缓冲盐(Sigma公司)。
　　实验步骤：(1)血清样本处理：血清标本冰浴解冻，10 000 r/min离心2 min。取血清样品5 μl，加10 μl 9 M尿素。振荡30 min，加180 μl缓冲液稀释(100 mmol/L　NaOAc pH 4.0)，4 ℃ 10 000 r/min离心2 min，取上清液待用。(2) 芯片处理：将芯片放入盛有100 mmol/L盐酸的试管中，振荡4～5 min，HPLC水冲洗，将芯片安装到Bioprocessor上，每孔加200 μl结合缓冲液，室温振荡5 min，弃掉液体，重复一次。每孔上样100 μl已处理好的血清样品，室温振荡1 h。弃掉液体，用200 μl结合缓冲液(100 mmol/L NaOAc pH4.0)洗2次，每次5 min，拆下芯片，待芯片自然干燥，然后每点加SPA 0.5 μl ， 两次。干燥，用CM10蛋白芯片阅读仪读芯片。 SPA=Sinapinic acid为CAN(乙腈)50 %和TFA(三氟乙酸)0.5 %的饱和溶液。(3)数据收集：设定检样激光强度195，检测灵敏度8，收集数据质荷比(M/Z)范围1.0～2.0 KD。收集位置20～80。平均每点收集20次，收集总点数是140次。在每次实验数据收集前，用All-in-one蛋白芯片校正仪器，使之误差<0.1 %。以质量控制蛋白质芯片做重复性检测，其峰值的大小及其强度的变异系数(CVS)均控制在0.05 %和15 %以下，具有良好的重复性。
　　危重病人预警蛋白(LGT)检测：即SELDI检测方法(全称是[SELDI-TOF-MS]，即表面增强激光解析离子飞行时间(time of flight)质谱技术)。出现在质核比(M/Z)11 000+H至12 000+H之间的蛋白质指纹即为LGT指纹，以出现单峰或以上质谱峰簇(cluster)且丰度值≥5%为LGT阳性[2]。
　　1.3　统计学处理　观察无疾病进展生存期的中位生存期。所有数据均采用SPSS 16.0统计软件进行处理。统计学方法选择Kaplan-Meier法。P<0.05为差异有统计学意义。
　　2　结果
　　2.1　影响术后结直肠癌患者无疾病进展生存时间的单因素分析见表1。
　　表1　影响术后结直肠癌患者无疾病进展生存时间的单因素分析
　　从表中可以看出，LGT阳性患者无疾病进展生存时间仅为2.80个月，而LGT阴性患者的无疾病进展生存时间为10.00个月，其无疾病进展生存时间曲线如图1。(责任编辑：南粤论文中心)转贴于南粤论文中心: http://www.nylw.net(南粤论文中心__代写代发论文_毕业论文带写_广州职称论文代发_广州论文网）