(i-67和PTEN、Galectin-3K在胸腺瘤中的表达及其临床意义)胸腺瘤是最常见的纵隔肿瘤，约占原发纵隔肿瘤的15%，占前纵隔肿瘤的50%〔1〕，其既有复杂的镜下结构，又存在病理与预后的矛盾〔2〕，发生机制目前仍不十分清楚。本研究采用免疫组织化学方法研究PTEN、Galectin3及Ki67在胸腺瘤中的表达情况及其相互关系，探讨其表达与胸腺瘤临床病理学特征的关系，为胸腺瘤的临床诊断、恶性程度的判断、治疗方法的选择及预后的评价提供理论依据。
1 资料与方法(i-67和PTEN、Galectin-3K在胸腺瘤中的表达及其临床意义)
1.1 标本来源 40例胸腺瘤标本为本院2007年7月至2009年6月经病理证实的手术切除标本。其中男22例，女18例；年龄2～73岁，平均年龄38岁。按照WHO分型〔3〕：A型6例，AB型10例，B1型10例，B2型7例，B3型7例。按Masaoka分期标准〔4〕：Ⅰ期15例，Ⅱ期11例，Ⅲ期9例，Ⅳ期5例。全部标本均经10%甲醛固定，石蜡包埋，切片厚4 μm。用 5例先天性心脏病手术患者正常胸腺组织作对照，其中男 3例，女 2例；年龄2～14岁， 平均年龄 5岁。
1.2 试剂和方法 采用免疫组织化学 SP法，鼠抗人PTEN单克隆抗体，兔抗人 Galectin3多克隆抗体，鼠抗人Ki67单克隆抗体，SP免疫组织化学试剂盒及二氨基联苯胺（DAB）显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。操作步骤严格按SP免疫组织化学试剂盒说明进行。以磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗作阴性对照。
1.3 结果判断 阳性染色指显微镜下观察细胞内具有清晰可见定位准确的黄色、棕黄色或棕褐色颗粒，而且背景清晰。PTEN蛋白和Galectin3均定位于细胞浆，Ki67蛋白定位于细胞核。由2位以上病理医生对免疫组织化学染色进行评价，在400倍视野下任意选择5个视野，每个视野计数200个细胞，细胞无阳性反应或阳性细胞数<10%为阴性， 阳性细胞数>10%为阳性。用已知阳性片作阳性对照，PBS代替一抗作阴性对照。
1.4 统计学分析 应用SPSS15.0统计软件进行统计处理，用χ2检验及Fisher's精确概率法进行显著性检验，用Spearman等级相关进行相关性分析。
2 结果(i-67和PTEN、Galectin-3K在胸腺瘤中的表达及其临床意义)
2.1 PTEN在胸腺瘤中的表达 PTEN在5例正常胸腺组织中全部阳性表达，在16例A+AB型胸腺瘤患者中有12例（75.0%）阳性表达，17例B1+B2型胸腺瘤患者中仅有5例（29.4%）阳性表达，7例B3型胸腺瘤患者中有1例（14.3%）阳性表达，组间比较差异有统计学意义(P=0.006)。见表1。PTEN在Masaoka分期I+Ⅱ期患者中阳性表达率(57.7%)显著高于Ⅲ+Ⅳ期(21.4%)，差异有统计学意义(P=0.029)。见表2。
2.2 Galectin3在胸腺瘤中的表达 Galectin3在5例正常胸腺组织中表达微弱，在16例A+AB型胸腺瘤患者中有7例（43.8%）阳性表达，在17例B1+B2型胸腺瘤患者中有14例(82.4%)阳性表达，在7例B3型胸腺瘤患者中有6例(85.7%)阳性表达，组间比较差异有统计学意义（P=0.032），见表1。Galectin3在Masaoka分期I+Ⅱ期患者中阳性表达率(53.8%)显著低于Ⅲ+Ⅳ期(92.9%)，差异有统计学意义(P=0.012)，见表2。
2.3 Ki67在胸腺瘤中的表达 Ki67在5例正常胸腺组织中无1例阳性表达，在16例A+AB型胸腺瘤患者中有8例（50.0%）阳性表达，在17例B1+B2型胸腺瘤患者中有15例(88.2%)阳性表达，在7例B3型胸腺瘤患者中有6例(85.7%)阳性表达，组间比较差异有统计学意义（P=0.034），见表1。Ki67在Masaoka分期I+Ⅱ期患者中阳性表达率(61.5%)显著低于Ⅲ+Ⅳ期(92.9%)，差异有统计学意义(P=0.034)。见表2。
表1 胸腺瘤WHO组织分型与胸腺瘤PTEN，Galectin3和Ki67的阳性表达率的关系（略）
表2 Masaoka分期与胸腺瘤PTEN，Galectin3和Ki67的阳性表达率的关系（略）
2.4 PTEN，Galectin3和Ki67在胸腺瘤中表达的相关性分析 在胸腺瘤中PTEN和Galectin3、Ki67的表达呈显著负相关（r=-0.227,-0.279;均P<0.05）。见表3。
表3 40例胸腺瘤患者中PTEN与Galectin3、Ki67表达的关系（略）
3 讨论(i-67和PTEN、Galectin-3K在胸腺瘤中的表达及其临床意义)
1997年，国际上3个研究小组几乎同时发现了一个新的抑癌基因， 即在第 10号染色体有缺失的、与细胞骨架蛋白tensin同源的PTEN基因。该基因位于人10号染色体(10q23.3) 上，全长200 kb，有9个外显子和8个内显子，PTEN第5个外显子编码的122～132位氨基酸序列与酪氨酸酯酶或丝/苏氨酸、酪氨酸双特异磷酸酯酶催化中心的氨基酸序列高度一致。PTEN基因转录产物具有去磷酸化作用，可以使某些磷脂或蛋白激酶的某个位点脱磷酸化，其在PI3K／AKT信号传导通路中起关键性调控作用，通过此通路的调控，抑制细胞周期的进展、介导细胞凋亡〔5〕。最新研究还发现 PTEN 在胚胎发育以及血管形成中也具有重要作用〔6〕。本组实验显示，PTEN蛋白在胸腺瘤组织中的表达显著低于正常胸腺组织，且与肿瘤的WHO分型、Masaoka分期以及肿瘤恶性程度、侵袭能力呈显著负相关；提示PTEN基因的失活可能促进了胸腺瘤的发生和浸润转移的进程，PTEN在一定程度上可以作为判断胸腺瘤恶性程度和预后的指标。(责任编辑：南粤论文中心)转贴于南粤论文中心: http://www.nylw.net(南粤论文中心__代写代发论文_毕业论文带写_广州职称论文代发_广州论文网）
