前言

喹诺酮为一类人工合成的新型抗菌药，主要 用于人类和动物多种组织感染性疾病．由于其具 有抗菌谱广、高效、低毒、与其他抗菌药物无交叉 耐药性等特点，已成为兽医临诊和水产养殖中最 重要的抗感染药物之一，被大量用于预防和治疗 动物疾病．由于细菌对喹诺酮类药物耐药性的产 生和某些喹诺酮类药物的潜在致癌风险，其残留 问题已引起广泛关注．世界卫生组织、欧盟、日本 等国家和组织都对喹诺酮类药物在动物食品中的 残留进行了最高限制．我们国家也对这些药物的 使用进行了限制规定，因此有必要建立快速和准 确的监督和分析这些药物在动物体及其相关食品 中的含量的分析方法．
动物源性食品中喹诺酮药物残留量的检测方 法主要有免疫分析法⋯、高效液相色谱(HPLc) 及其联用方法怛引，荧光分析法Ho等．高效液相色

收穑日期：2009埘_03
基金项目：河南教育厅科研基金资助(2008A150009)；河南工业 大学博士基金(2006Bs010)；湖南大学化学、生物传感与国家重 点实验室开放基金(2007009)；河南工业大学校基金(07Ⅺc004) 作者简介：尹春玲(1970一)，女，吉林省吉林市人，副教授，硕士。主 要研究方向为食品分析．
•通讯作者
谱及其联用技术灵敏度高，选择性和特异性好，是
目前较为先进的残留分析方法。但此类方法的一 个缺点是在分离多个药物的时候，因为药物的光 谱往往会重叠在一起，因此需要选择大量有机溶 剂调节色谱条件来将各个药物分开，这样就会产 生较多有害废液污染环境．而免疫分析在分析复 杂体系时影响因素比较多，可能导致结果不准确． 因为多个药物的荧光往往重叠严重，采用荧光分 析时需要借助色谱的预先分离，而借助化学计量 学结合三维荧光分析技术则可以用数学分离部分 代替色谱分离，从而减少有害溶剂的使用．笔者利 用平行因子分析(PARAFAc)算法及交替不对称 三线性分解(AATLD)算法，分别与三维荧光光谱 相结合，对牛奶中的3种氟喹诺酮类药物进行了 同时定量分析研究．

1    原理

1．1二阶三线性模型
二阶三线性模型可以表示为如下方程： x．．^=A，。Ⅳdi昭(c：)曰；。Ⅳ+层I   后=1，2，⋯，K 对于三维荧光分析仪器而言，X。指仪器多次测 量得到的三维数阵x的第矗个切面，它对应单次
样品测量得到的腑一EM矩阵；E。是误差方阵E
对应的第||}个切面，表示每一次测量的误差矩阵；
c。是矩阵c的第后行．di口g(c：。)是指将矢量c；对
角化转变为ⅣxⅣ的对角阵．其中A、曰和C分别
相应于荧光激发、发射光谱及浓度矩阵．Ⅳ指的是 正确拟合二阶三线性模型需要的因子数，它既包 括感兴趣的化学物质和干扰，也包括拟合模型作 补偿需要的背景因子等．
1．2   PARAFAC分解算法(ParalIel factor anal• ysis)‘51 只要对三维数阵x中的因子数Ⅳ估计正确，
三维数阵三线性分解就可以得到唯一正确解．最 早拟合三维数据的算法是PARAFAC分解算法， 其主要思想是通过交替优化以下目标函数F(A， 曰，C)来获得载荷矩阵A、曰和C．
置
F(A，口，c)=∑o墨．。一Adiog(c：)丑’o；
该算法应用了对称求解思想，即解决3个载 荷矩阵采用了相同的目标函数，这种对称性的算 法容易使算法陷入二阶衰退，导致收敛的速度较 慢，详见文献[5]．最后浓度可以通过下式求得：
c：=ding(A+x．，^(B1)+) 后=1，￡，K． 这里+指的是Moore．Penrose广义逆．cI为第．|}个 预测样品中的浓度．
1．3    AATLD算法(Ahernating asymmetric tri— linear decomposition)‘‘3 除了经典的PARAFAc算法之外，化学计量
学研究中提出了多个二阶校正算法，这些算法分 别适用不同的数据结构．Hu   L Q等也提出了一个 交替不对称三线性分解算法(AATLD)哺o，该算法 采用一个不对称的思路，克服了传统算法收敛慢， 容易遭受二阶衰退的不足，在三维数据解析中取 得了满意的计算结果．AATLD算法通过最小化以
下3个目标函数：
F(A)=9 x，。肛一A(曰I O c)1|l；
F(丑)=1I xJ。腰一曰(A  o c)1 Il；
置
F(c)=∑o，。脂一Adi口g(c：)曰7   o；
通过交替最小二乘算法求解上面的目标函数可以 得到A、曰和e详细的介绍见文献[6]．

2  材料与方法

2．1主要仪器与试剂
Varian cary ecolipse型荧光分光光度计：美国 瓦里安公司；弗洛沙星(FLE)、培氟沙星(PEF)、 伊诺沙星(ENO)标准品均购自中国药品生物制 品检定所，其他所用药品均为分析纯．所有溶液配
置均采用二次蒸馏水．
2．2配制标准溶液
精确称量弗洛沙星0．111 5  g，培氟沙星
0．163 7 g，均用0．1  mol／L NaOH溶液溶解并定 容至250  mL，伊诺沙星O．146  5 g，用O．1  mol／L NaOH溶液溶解并定容至100 mL，配置后放在4
℃下．实验时用pH 4的乙酸钠／乙酸缓冲溶液稀 释后备用．
2．3牛奶的样品处理
称取牛奶2 mL，置于聚丙烯离心管中，用4 mL 1％(体积分数)乙酸的乙腈溶液于3 500 r／min离心10   min，收集上清液于另一干净离心管 中，加入4 mL正己烷，混合1 min，继续在3 500 r／min离心10   min，弃去正己烷层．将下层(乙腈 层)转移人100 mL鸡心瓶中，加入5    mL异丙醇， 混合均匀，于45℃减压蒸发至近干．用pH     4的乙 酸钠／乙酸缓冲溶液稀释后备用．
2．4配制校正样和预测样
取15个10 mL的容量瓶，其中l～9号用作 校正样，分别加入浓度不同的3种药物，不加入牛 奶，10～15号样除加入浓度不同的3种药品之 外，分别加入1 mL的牛奶，作预测样．所有样品中 均加入1 mL的0．1 mol／L的SDS(十二烷基硫酸 钠)溶液，分别用pH   4的乙酸钠／乙酸缓冲溶液 定容至lO m L．空白液由1  mL O．1 mol／L的sDs 溶液和pH 4的乙酸钠／乙酸缓冲溶液定容至10 mL组成．空白穿插平行测定4次，求其平均值．
2．5参数设置
激发波长为200一550   nm，每隔5  nm取1个 数据；发射波长为220～600    nm，每隔5  nm取1 个数据．狭缝宽度为5．O／5．O  nm．扫描速度为(责任编辑：南粤论文中心)转贴于南粤论文中心: http://www.nylw.net(南粤论文中心__代写代发论文_毕业论文带写_广州职称论文代发_广州论文网）