(实验研究 斑蝥黄质抗去势雌性大鼠骨质疏松)Effects of Canthaxanthin on osteoporosis in ovariectomized rats
PEI LingPeng, LI Li, YIN Lu，et al.
Research Institution of Orthopaedics, China Academy of Chinese Medicine Science, Beijing 100700, China
【Abstract】 Objective To study and analyze the effects of canthaxanthin on osteoporosis of ovariectomized rat models. Methods Seventytwo 15 weeks old SD rats were divided into six groups, including control group and five ovariectomized models. After model groups were fed by different dosages canthaxanthin（10,15,20 mg/kg）for 12 weeks, related indexes, including their length bone mineral density（BMD）, bone mineral, serum estradiol, serum alkaline phosphatase（ALP）and uterus index were analyzed. Results Compared with the model group, different dosages groups and nilestriol group had the increased BMD, bone mineral, serum estradiol and uterus index, and the decreased serum ALP (P<0.05). Conclusions As a female sex hormonelike component, canthaxanthin may ameliorate the bone quality and inhibit osteoporosis of ovariectomized rat models.
【Key words】 Osteoporosis；Canthaxanthin；Bone mineral density；Female sex hormone(实验研究 斑蝥黄质抗去势雌性大鼠骨质疏松)
(实验研究 斑蝥黄质抗去势雌性大鼠骨质疏松)绝经后骨质疏松(OP)与卵巢功能衰竭、合成的激素降低有关。斑蝥黄质属一种类胡萝卜素类化合物，研究表明其具有抗氧化、防止心血管疾病、提高免疫力、抗癌等多种生物学活性〔1〕。近来对此类化合物干预成骨细胞、破骨细胞的研究越发引人关注〔2〕。而到目前为止，国内外有关斑蝥黄质与去势雌鼠OP方面的研究尚无报道。因此，本实验以切除雌鼠卵巢所致OP为模型，模仿人正常绝经时高转换型OP发生时的骨丢失状态,观察斑蝥黄质对抗此症的效果并初步探讨其作用机制。
1 材料与方法(实验研究 斑蝥黄质抗去势雌性大鼠骨质疏松)
1.1 材料
1.1.1 动物 15周龄72只SD雌性大鼠均购自中国医学科学院实验动物养殖中心，体重为218～220 g。
1.1.2 试剂及仪器 双能X线骨密度测量仪（美国GE公司）；Labconco冰冻真空干燥仪（法国乐高公司）；752分光光度计、AE100电子天平（中国伯乐公司）；电热三用水箱、KA1000型台式离心机（中国杭州华亭公司）；J2SH高速冰冻离心机（日本岛津公司）；C30柱（YMC Carotenoid S5，Waters），高效液相色谱(HPLC，Waters 600E溶剂输送系统，PDA2996二极管阵列检测器Waters）；灌喂所用斑蝥黄质由本实验室购自罗氏制药公司斑蝥黄质乳化剂，并经制备获得；乙腈、甲醇、甲基叔丁基醚（MTBE）（迪马公司）；无水乙醇（北京化学试剂公司）；大孔吸附树脂（天津农业股份公司）；雌二醇（E2）试剂盒（Sigma公司）；碱性磷酸酶（ALP）试剂盒（科海生物科技有限公司）。
1.2 方法(实验研究 斑蝥黄质抗去势雌性大鼠骨质疏松)
1.2.1 动物模型制备 首先各组动物经腹腔注射2%戊巴比妥(35 mg/kg)达到麻醉效果后,分别沿腹正中线剪开皮肤,分离肌肉、筋膜及腹腔脏层,暴露腹腔。除空白组行假手术,切除卵巢附近一小块脂肪组织外,余各组结扎及剪断双侧卵巢组织,分层缝合肌肉,皮肤。术后2 w给药组开始灌胃斑蝥黄质。
1.2.2 药物制备 称取10 g斑蝥黄质乳化颗粒加入300 ml丙酮正己烷萃取。静置2 h后，将脂溶性相收集后进行提取液浓缩处理。分别取2 ml斑蝥黄质提取浓缩液上柱，用50 ml正己烷丙酮淋洗，收集洗脱液，用氮气吹干后复溶于正己烷，利用HPLC进行定性定量分析。
1.2.3 给药方法 空白组及模型组给予等量蒸馏水灌胃,尼尔雌醇组按1.05 mg/kg体重(为人体剂量的20倍)灌胃,斑蝥黄质高（20 mg/kg）、中（15 mg/kg）、低（10 mg/kg）组(分别为人体剂量的20、10、5倍)灌胃给药。
1.2.4 标本采集 连续灌喂12 w后,大鼠称重、麻醉后股静脉取血活杀动物,离心取血行生化指标检测；取右侧股骨进行骨密度、骨矿含量测定；取子宫称重。
1.2.5 检测方法 大鼠在灌喂斑蝥黄质前后进行称重；股骨密度使用LunarXR型双能X线骨密度仪测定；ALP和E2按照试剂盒说明进行测定。
1.3 统计学处理 所有数据用x±s表示，用SPSS10.0统计软件进行统计，组间差异比较用单因素方差分析。
2 结果(实验研究 斑蝥黄质抗去势雌性大鼠骨质疏松)
2.1 斑蝥黄质提取与鉴定 有机试剂的反复提取后，通过柱层析可以得到高纯度的斑蝥黄质提取物，经HPLC及其光谱特征峰鉴定为全反式斑蝥黄质单体。(责任编辑：南粤论文中心)转贴于南粤论文中心: http://www.nylw.net(南粤论文中心__代写代发论文_毕业论文带写_广州职称论文代发_广州论文网）
